Об очках:

Особенности положения линз в прилегающих оправах

News image

Кривизна и прилегающая форма, которые делают спортивные очки такими функциональными, оказывают влияние на оптические свойства и расположение очковых...

Особенности подбора очков

News image

Большое количество советов по подбору оправ направлено на создание определенного имиджа человека, при этом консультанты часто ориентируются на после...

Носил ли очки святой Иероним?

News image

Эта проблема была знакома людям еще в XIV веке, то есть практически сразу после появления первых очков в Европе. Чаще всего на плохое зрение жаловал...

ОЧКИ – ЭТО ВРЕДНАЯ ПРИВЫЧКА

News image

Последний месяц я хожу по улице без очков. И за этот короткий период (!) я УЖЕ вижу четче. Как вы помните, я сменила очки на гораздо более слабые. Т...



Экспертиза биологически активных добавок и лекарственных препаратов для зрения

Как улучшить зрение - Новые технологии лечения нарушений зрения

экспертиза биологически активных добавок и лекарственных препаратов для зрения

Д.х.н. Готтих М.Б., Ташлицкий В.Н.
НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ

Введение

Антоцианозиды и флавоноиды, содержащиеся в листьях и плодах черники(Vaccinium myrtillus), благодаря их выраженному антиоксидантному и сосудопротекторному действию, представляют для офтальмологов особый интерес [1].

По данным различных авторов, антоцианозиды черники способствуют улучшению реологических свойств крови, поскольку снижают тонус сосудистой стенки и способствуют ее укреплению (эффект обусловлен участием данных веществ в регуляции биосинтеза коллагена), уменьшают тромбообразование, а также ускоряют регенерацию обесцвеченного родопсина - светочувствительного пигмента сетчатки. Ускорение регенерации родопсина и активация ферментов сетчатки под влиянием экстракта черники улучшают ночное зрение, снижают риск развития дистрофии сетчатки, ускоряют процесс восстановления зрения после длительных зрительных нагрузок [2,8]. За счет положительного влияния на синтез фосфолипидов клеточных мембран, антоцианозиды черники уменьшают хрупкость капилляров, восстанавливают их проходимость при сосудистых расстройствах (тромбозах), что способствует улучшению трофики сетчатки глаза.

Кроме того, антоцианозиды и флавоноиды черники подавляют патологическую альдозо-редуктазную активность в тканях хрусталика и предупреждают развитие катаракты [3].

Антоцианозиды являются основными действующими на зрение веществами черники. Они представляют из себя соединения антоцианинов с углеводами (гликозиды) [4]. Это состояние обеспечивает их устойчивость к свету и действию ферментов, а кроме того - в форме гликозидов улучшается растворимость пигментов в клеточном соке [5]. Гликозиды из состава антоцианозидов не проходят через клеточную мембрану, поэтому основу фармакологической активности экстрактов составляют именно антоцианины [6]. Эффективность антоцианинов доказана в ряде исследований [7].

В настоящее время в России зарегистрированы несколько пищевых добавок и лекарственных препаратов офтальмологического профиля, содержащих экстракты черники. Поскольку польза препаратов с черникой напрямую зависит от концентрации антоцианинов в них, нами была проведена экспертизабиологически активных добавок и лекарственных препаратов для зрения с целью определения качественного и количественного состава. Для анализа мы использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и рН-дифференциальную УФ-спектрофотометрию.

Цель исследования: определение количественного и качественного содержания антоциановых пигментов черники в пяти образцах следующих препаратов: «Фокус» (производитель АКВИОН, Россия), «Витрум вижн форте» (производитель Unipharm Inc, США), «Черника-форте» (производитель Эвалар, Россия), «Окулист» (производитель ДИОД, Россия), «Стрикс» (производитель Ferrosan, Дания).

Материалы и методы исследования:

Для исследований в аптеках и аптечных пунктах были закуплены пять образцов биологически активных добавок для глаз, в состав которых входит черника: «Витрум вижн форте», «Фокус», «Стрикс», «Окулист», «Черника-форте».

В работе данные образцы были зашифрованы следующим образом:

Препарат

«Фокус» (АКВИОН, Россия)

1

«Витрум вижн форте» (Unipharm Inc, США)

2

«Черника-форте» (Эвалар, Россия)

3

«Окулист» (ДИОД, Россия)

4

«Стрикс» (Ferrosan, Дания)

5

Подготовка образцов для исследования:

Антоцианины из образцов экстрагировали дистиллированной водой из расчета содержания антоцианинов 0,05–0,2 мг/мл [9]. Для этого таблетка или содержимое капсулы тщательно измельчались в агатовой ступке. Для экстракции соответствующая навеска порошка каждого образца помещалась в пластиковую пробирку объемом 50 мл и добавлялся рассчитанный объем дистиллированной воды (от 10 до 50 мл в зависимости от навески и образца) для получения растворов с концентрацией 2,0; 4,0; 5,0; 2,0 и 2,0 мг/мл для образцов 1–5 соответственно. Для ВЭЖХ исследования были приготовлены растворы с большей концентрацией – 20,0 мг/мл; 40,0; 50,0; 20,0 и 20,0 мг/мл для образцов 1–5 соответственно. Экстракция проводилась при непрерывном перемешивании на термошейкере C24KC Refrigerated incubator shaker Edison, NJ, USA, при 160 об./мин, температуре 37 оС, в течение 30 мин. Из полученных растворов отбирались аликвоты объемом 1 мл, которые центрифугировали 10 мин при 14 000 об./мин, фильтровали через Millex-GV13, 0,22 um, 13 mm Filter Unit, MILLIPORE и хранили при –10 оС.

Определение суммарного содержания антоцианиновых пигментов методом рН-дифференциальной спектрофотометрии.

Для метода рН-дифференциальной спектрофотометрии были использованы буферные растворы № 1 и № 2:

·  Раствор № 1: рН 1 – 4,05 мг КСl, 1,238 мл конц. НСl в 100 мл воды.

·  Раствор № 2: рН 4,5 – 1,64 г натрия ацетата в 100 мл воды и НСl до рН 4,5.

К 0,96 мл буферного раствора № 1 или № 2 добавляли 40 мкл экстракта, приготовленного как описано выше, и определяли оптическую плотность при 510 нм и 700 нм с соответствующим буфером в качестве раствора сравнения. Использовали УФ-спектрофотометр Cary 50bio производства Varian (США). Для каждого образца эксперимент проводили дважды.

Суммарное содержание антоцианиновых пигментов рассчитывали по формуле [7]:

С (Σантоцианин, масс. %) = 100 %Ч[(А510рН1– А700рН1) – (А510 рН4,5 – А700рН4,5)] Ч MW Ч F/(ε Ч l Ч C),

где:

ε и MW – коэффициенты молярного поглощения и молекулярная масса антоцианина, используемого в качестве стандарта (для цианидин-3-глюкозида 26 900 и 449,2 соответственно);

F = 25 – коэффициент разведения;

l =1 – длина оптического пути кюветы, см;

C – концентрация приготовленного раствора образца, г/л.

Определение качественного состава антоцианиновых пигментов методом ВЭЖХ

Качественный состав антоцианиновых пигментов определялся методом обращеннофазной ВЭЖХ на колонке Gemini C18(2) 4,6Ч150 mm (5um) производства Phenomenex (США). Использовалось градиентное элюирование с подвижной фазой А (0,151 % раствор трифторуксусной кислоты в воде) и подвижной фазой В (0,151 % раствор трифторуксусной кислоты в ацетонитриле) по программе 5–40 % В за 11 мин при скорости потока 1,5 мл/мин, температуре 25 °С, с УФ-детекцией при 520 нм и УФ-спектральными данными от 230 до 800 нм. Был использован хроматограф Agilent1100, состоящий из четырехканального градиентного насоса с дегазатором, автосамплера, термостата и диодно-матричного детектора. Сбор и обработка хроматограмм осуществлялась с помощью программ «ChemStation B.01.03» и «ACD/SpecManager 12.01».

Для ВЭЖХ-анализа образцов № 1, 4, 5 с концентрацией 20 мг/мл использовалась аликвота 1 мкл, а для образцов № 2, 3 с концентрацией 40 и 50 мг/мл – аликвота 10 мкл.

Результаты исследования и их обсуждение

С помощью УФ-спектрометрического анализа было исследовано суммарное содержание антоцианиновых пигментов во всех образцах. Полученные данные приведены в таблице 1.

Таблица 1. Расчет среднего содержания суммы антоцианиновых пигментов в образцах № 1–5 методом рН-дифференциальной спектрофотометрии

№ образца

C образца, г/л

А510

рН 1

А700

рН 1

А510

рН 4,5

А700

рН 4,5

Суммарная концентрация антоцианиновых пигментов, %

Масса капсулы (таблетки), г

Масса пустой капсулы

Масса суммы антоцианиновых пигментов в капсуле (таблетке), мг

Заявленная масса антоцианов, мг

1

2

0,2606

0,0046

0,0587

0,0051

4,225

0,382

0,0958

12,09 ± 0,97

12,5

2

4

0,0038

0

0,0031

0,0006

0,014

0,833

0

0,11 ± 0,009

-

3

5

0,022

–0,0002

0,0025

0,0004

0,168

0,2545

0

0,43 ± 0,034

-

4

2

0,0912

0,0001

0,0129

0,0011

1,655

0,3819

0,0731

5,11 ± 0,41

10

5

2

0,1035

–0,0001

0,0103

0,0009

1,966

0,459

0

9,03 ± 0,72

-

Как видно из полученных данных, все анализируемые образцы содержат антоцианиновые пигменты, однако их концентрация в разных образцах варьируется в широком диапазоне от 0,01 до 4,2 %, а содержание в одной таблетке или капсуле от 0,1 мг до 12,1 мг.

Для определения качественного состава образцов использовался метод обращеннофазной ВЭЖХ. Полученные результаты приведены на рис. 2. Отнесение пиков проводилось на основании времен удерживания и соотношения площадей. Времена удерживания и соответствующие площади пиков приведены в таблице 2. Как видно из хроматограмм и таблицы 2, качественный состав и соотношение компонентов всех исследованных образцов, кроме образца № 2, практически одинаковы (в пределах погрешности метода определения площади плохо разрешенных пиков) и соответствуют литературным данным для экстрактов черники [7]. Хроматографический профиль образца № 2 не соответствует антоцианиновым пигментам черники и, очевидно, имеет другой источник.

Таблица 2. Средние времена удерживания и площади хроматографических пиков, полученных при ВЭЖХ-анализе образцов № 1–5

v – объем аликвоты раствора образца, использованной для анализа;

C – концентрация раствора образца.

Выводы

На основании полученных данных (качественный анализ методом оф-ВЭЖХ) можно утверждать, что все исследованные образцы препаратов, кроме «Витрум вижн форте» (Unipharm Inc, США), действительно содержат антоцианиновые пигменты из экстрактов черники, а не из других природных источников. Препарат «Витрум вижн форте» (Unipharm Inc, США) содержит небольшое количество антоцианиновых пигментов из другого источника. Кроме того, количественное содержание этих соединений, определенное методом рН-дифференциальной спектрофотометрии, варьируется в широком диапазоне. В исследованных нами пищевых добавках и лекарственных препаратах офтальмологического профиля содержатся антоцианиновые пигменты из экстрактов черники (и другого источника) в следующем количестве (препараты расположены в порядке убывания):

Препарат

Содержание антоцианов черники в таблетке (капсуле), мг

«Фокус» (АКВИОН, Россия)

12,09

«Стрикс» (Ferrosan, Дания)

9,03

«Окулист» (ДИОД, Россия)

5,11

«Черника-форте» (Эвалар, Россия)

0,43

«Витрум вижн форте» (Unipharm Inc, США)

0,11




Читайте:


Добавить комментарий


Защитный код
Обновить

Как улучшить зрение:

News image

Расслабление мышц лица

Из-за плохого зрения, чтобы лучше разглядеть те или иные объекты, мы нередко напрягаем мышцы лица: прищуриваем веки, хмурим брови, сжимаем губы и т. п. В результате дыхание замед...

News image

Близорукость болезнь растущего организма

Разнообразное питание укрепляет соединительную ткань глаза и предотвращает развитие и прогрессирование близорукости, а также способствует улучшению зрения. Незаменимые питательны...

News image

Теория Геймгольца в изложении Жданова

И тогда Гельмгольц предложил компенсировать дальнозоркость с помощью двояковыпуклой плюсовой очковой линзы. А фокусное расстояние системы (выпуклая линза плюс плоский хрусталик) ...

Всё про контактные линзы:

Неоднозначность влагосодержания

News image

Парадоксальным кажется тот факт, что чем выше у контактных линз влагосодержание, тем в большей степени они способствуют проявлен...

Типы контактных линз

News image

Все типы существующих контактных линз можно разделить на несколько групп, в зависимости от материала, из которого они изготовлен...

Контактные линзы: им — «все возрасты покорны»!

News image

Прогресс в области контактной коррекции зрения начинается с разработки передовых материалов как для мягких контактных линз, так ...

Очистители контактных линз

News image

Отложения на контактных линзах Периодическая чистка является важной частью ухода за контактными линзами, однако, к сожалению ...

Авторизация

Проблемы со зрением:

Повышенная утомляемость глаз

News image

Повышенная утомляемость глаз, развитие дистрофически-дегенеративных изменений в светопроводящем, рецепторном и мышечном аппарате глаза могут быть пр...

Пигментная дегенерация сетчатки

News image

Пигментная дегенерация сетчатки (ПДС) - это относительно редкое, наследственное заболевание, которое связано с нарушением работы и выживания палочек...

Симптомы болезни:

Глэр-эффект

News image

Зрительная работоспособность зависит от яркости разрешающего объекта, яркости фона, на котором он предъявляется, и яркости (освещенности) перифериче...

Анизейкония

News image

Анизейкония характеризуется неравенством величин изображений одного и того же предмета на сетчатке правого и левого глаза. Разница в величине изо...

Исследование зрения:

ИССЛЕДОВАНИЕ ОСТРОТЫ ЗРЕНИЯ

News image

Для исследования остроты зрения применяются таблицы, содержащие несколько рядов специально подобранных знаков, которые называются оптотипами. В ...

ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКИЙ АНАМНЕЗ

News image

При выяснении анамнеза весьма важно обратить внимание на начало заболевания. При многих хронически протекающих процессах больные указывают как ...